Kromatogram for hva det er og typer



den kromatogram er en todimensjonal grafisk rekord som er oppnådd i et absorberende medium, som viser separasjonen av stoffer ved kromatografi. I kromatogrammet dannes et synlig mønster, topper eller flekker som reflekterer den fysiske separasjonen av komponentene i en blanding.

Den nedre figuren er et kromatogram med tre topper, A, B og C, av tre komponenter i prøven separert ved kromatografi. Det observeres at hver av de tre toppene har forskjellig høyde og plassering i kromatogrammets tidsakse.

Aksen til ordinatene eller Y registrerer informasjon om signalstyrken (i millivolts mV i dette tilfellet). Representerer registeret, avhengig av detektoren, av noen fysisk egenskap av stoffet eller separat komponent av blandingen.

Høyden på toppen er proporsjonal med konsentrasjonen av den separerte komponenten av prøven i et optimalt system. Således er det for eksempel lett å visualisere at komponent B er i større forhold enn A og C.

På abscissen eller X-aksen er retensjonstiden for komponentene i prøven eller blandingen representert. Det er tiden som går fra injeksjonen av prøven til den stopper, og er forskjellig for hver ren substans.

index

  • 1 Hva er et kromatogram for??
    • 1.1 Identifikasjon av stoffer
    • 1.2 Klassifisering av renhet av stoffer
    • 1.3 Kvantifisering av stoffer
  • 2 typer
    • 2.1 Kromatogram på papir eller tynn film
    • 2.2 Kromatogrammer generert av detektorer
  • 3 referanser

Hva er et kromatogram for??

Den utgjør den endelige oversikten over hele kromatografiprosessen. Derfra oppnås parametere som er av analytisk interesse. Dette kan hentes som en elektronisk fil, et trykt histogram eller i prosessstøtten; på papir, for eksempel.

Y-aksen genereres av signaldetektorer eller responsintensitet, for eksempel spektrofotometre. En optimal analyse av tiden, karakteristikkene ved toppene eller punktene som er oppnådd, er uunnværlig; størrelse, plassering, farge, blant annet.

Analyser av kromatogrammer krever generelt bruk av kontroller eller standarder, identitetsstoffer og kjent konsentrasjon. Analysen av disse kontrollene gjør det mulig å etablere i sammenligning med prøvene karakteristiske for komponentene i den undersøkte prøve.

I kromatogrammet kan du observere og analysere hvordan separasjonen av komponentene i en blanding ble utført. Den optimale studien gjør det mulig å identifisere et stoff for å demonstrere dets renhet, for å kvantifisere mengden stoffer som er tilstede i en blanding, blant annet.

Oppsamlet informasjon kan være av kvalitativ karakter; for eksempel når stoffer identifiseres og deres renhet bestemmes. Den kvantitative informasjonen er relatert til bestemmelsen av antall komponenter av blandingen og konsentrasjonen av den separerte analyt.

Identifikasjon av stoffer

Ved å analysere resultatene av kromatogrammet, kan forskjellige stoffer identifiseres ved å sammenligne retensjonstidene med det for de kjente substansene. Det kan observeres om stoffene som er under studiet, reiser samme avstand hvis de har samme tid som de kjente stoffene.

For eksempel gjør kromatogrammet det mulig å oppdage og identifisere i urin av atleter stoffet metabolitter som stimulanter og steroider. Det er en viktig støtte i studien og undersøkelsen av noen metabolitter produsert av genetiske lidelser hos nyfødte.

Kromatogrammet muliggjør deteksjon av halogenerte hydrokarboner som finnes i drikkevann, blant annet stoffer. Det er uunnværlig i laboratorieanalysen av kvalitetskontroll, siden det gjør det mulig å oppdage og identifisere forurensningene som finnes i de forskjellige produktene.

Klassifisering av renhet av stoffer

I et kromatogram kan du skille mellom rene og urenheter. Et rent stoff ville produsere en enkelt topp i kromatogrammet; mens et uren stoff ville produsere to eller flere topper.

Ved å tilpasse forholdene under hvilke kromatografi utføres, kan to stoffer forhindres fra å danne en enkelt topp.

Kvantifisering av stoffer

Ved å analysere området av toppene av kromatogrammet, kan konsentrasjonen av komponentene i prøven beregnes.

Derfor er topparealet proporsjonalt med mengden av stoffet som er tilstede i prøven. Disse kvantitative data oppnås i svært følsomme systemer, som for eksempel de som genererer gass- eller væskekromatografi.

typen

En av klassifikasjonene av kromatogrammet er nært beslektet med de forskjellige typer kromatografi, som genererer det tilsvarende kromatogram.

Avhengig av vilkårene for utførelse av detektorer, vil kromatogrammet blant annet variere i innhold og kvalitet.

Kromatogram på papir eller tynn film

Kromatogrammet kan genereres direkte på papir eller tynn film, som direkte viser fordelingen eller fordelingen av komponentene i prøven.

Det er veldig nyttig for separasjon og studier av fargede stoffer som har naturlige pigmenter, for eksempel klorofyll. Det kan bli underlagt utviklingsprosesser hvis stoffene ikke har naturlig farge, og er nyttig for kvalitative studier.

Kromatogrammer generert av detektorer

Kromatogrammet kan også oppnås ved bruk av en detektor som registrerer respons, utgang eller slutt signal av kromatografien. Som nevnt tidligere er denne detektoren vanligvis et spektrofotometer, et massespektrometer, blant annet automatisk sekvenser, elektrokjemikalier..

Kromatogrammer generert i kolonner, enten av gasser eller væsker, samt de med høy oppløsning i tynn lag, bruk detektorer.

Avhengig av typen detektor kan kromatogrammet klassifiseres som differensial eller integrert, avhengig av detektorens responsform.

Differensial kromatogram

En differensialdetektor måler kontinuerlig kretsens respons signal, mens integraldetektorer kumulativt måler det tilsvarende signalet.

Et differensialkromatogram er et kromatogram oppnådd av en differensialdetektor. Blant disse detektorene kan nevnes for eksempel spektrofotometre og detektorer av endringer i elektrisk ledningsevne.

Denne typen kromatogram har vist resultatet av separasjonen av anioner fra en prøve, detektert ved indirekte fotometri. Også de samme resultatene er oppnådd for studiet av ioner, for eksempel med endelig deteksjon ved ledemetri.

Den øvre grafen viser eksemplet på et differensialkromatogram, oppnådd ved hjelp av automatiske DNA-sekvenser (deoksyribonukleinsyre). Grafen viser klart topper av fire farger, en farge for hver av DNA-nitrogenbasene.

Gjennom støtte av et datastyrt program, blir tolkningen av sekvensen av DNA-basene analysert lettere, så vel som for mer komplekse analytter..

Omfattende kromatogram

Det integrerte kromatogrammet tilsvarer det som oppnås ved hjelp av en integrert detektor. I dette kromatogrammet er utgangen av en enkelt komponent under studiet påvist. Ingen toppene oppnås som i differensialet.

I det integrerte kromatogrammet oppnås en plate med en form som er beskrevet som et trinn. Dette skjemaet er delen av kromatogrammet som tilsvarer mengden av en enkelt substans som forlater kolonnen.

referanser

  1. Bhanot, D. (2013). Hvordan lese til kromatogram? Hentet fra: lab-training.com
  2. Carey, F.A. (2006). Organisk kjemi sjette utgave. Mc Graw Hill
  3. Kromatografi i dag. (2014). Hva er et kromatogram? Hentet fra: chromatographytoday.com
  4. Mathias, J. (2018). En nybegynners guide: Hvordan tolke gasskromatografi kromatografi Massespektrometri resultater. Hentet fra: innovatechlabs.com
  5. Spansk Samfunn Kromatografi og tilhørende teknikker. (2014). Kromatogrammet. Gjenopprettet fra: secyta.es
  6. Wikipedia. (2019). Papirkromatografi. Hentet fra: wikipedia.org