Nephelometry i hva den består av og applikasjoner
den nefelometri består i måling av stråling forårsaket av partikler (i oppløsning eller i suspensjon), og måler således strømmen til den spredte strålingen i en annen vinkel enn retningen for den innfallende strålingen.
Når en partikkel i suspensjon er nådd av en stråle av lys, er det en del av lyset som reflekteres, en annen del blir absorbert, en annen del avledes og resten overføres. Det er derfor når lyset treffer et gjennomsiktig medium der det er en suspensjon av faste partikler, blir suspensjonen observert overskyet.
index
- 1 Hva er nephelometri??
- 1.1 Dispersjon av stråling med partikler i oppløsning
- 1,2 Nephelometer
- 1.3 Avvik
- 1.4 Metrologiske egenskaper
- 2 applikasjoner
- 2.1 Deteksjon av immunkomplekser
- 2.2 Andre applikasjoner
- 3 referanser
Hva er nephelometri??
Dispersjon av stråling av partikler i oppløsning
I det øyeblikk hvor en stråle av lys rammer partiklene av et stoff i suspensjon, forandrer strålingsretningen sin retning. Denne effekten avhenger av følgende aspekter:
1.Dimensjoner av partikkelen (størrelse og form).
2. Suspensjonsegenskaper (konsentrasjon).
3. Bølgelengde og intensitet av lys.
4. Avstand av hendelseslys.
5. Deteksjonsvinkel.
6. Brekningsindeks for mediet.
nefelo
Nephelometeret er et instrument som brukes til å måle partikler suspendert i en flytende prøve eller i en gass. Så en fotocelle plassert i en vinkel på 90 ° med hensyn til en lyskilde detekterer strålingen av partiklene som er tilstede i suspensjonen.
Lyset reflekteres også av partiklene mot fotocellen avhengig av partiklens tetthet. Diagram 1 presenterer de grunnleggende komponentene som utgjør en nebelometer:
En. Strålingskilde
I nephelometri er det viktig å ha en strålekilde med høy lyseffekt. Det finnes forskjellige typer, som spenner fra xenonlamper og kvikksølvdamper, wolfram halogenlamper, laserstråling, blant andre.
B. Monokromatorsystem
Dette systemet ligger mellom stråle- og kuvettkilden, slik at forekomsten på strålekuvuetten med forskjellige bølgelengder i forhold til ønsket stråling unngås.
I motsatt fall vil fluorescensreaksjoner eller oppvarmingseffekter i løsningen føre til avvik fra måling.
C. Leser kuvette
Det er en generelt prismatisk eller sylindrisk beholder, og kan ha forskjellige størrelser. I denne er løsningen i studien.
D. detektoren
Detektoren befinner seg i en bestemt avstand (vanligvis svært nær tanken) og er ansvarlig for å detektere strålingen dispergert av suspensjonspartiklene.
E. Lesesystem
Vanligvis er det en elektronisk maskin som mottar, konverterer og behandler data, som i dette tilfellet er målingene fra studien utført.
avvik
Hver måling er underlagt en prosentandel feil, som hovedsakelig er gitt av:
Forurenset bøtter: i kuvetterne reduserer ethvert middel som er utenfor studieoppløsningen, som er inne i eller utenfor kyvetten, strålingslyset på banen til detektoren (defekte kuvetter, støv som er festet til kuvettens vegger).
forstyrrelser: Tilstedeværelsen av noe mikrobiell kontaminant eller turbiditet sprer strålende energi, noe som øker intensiteten av dispersjonen.
Fluorescerende forbindelser: Disse er forbindelser som, når de er opphisset av innfallende stråling, forårsaker feilaktige og høye avlesninger av dispersjonstettheten.
Bevaring av reagenser: den utilstrekkelige temperaturen i systemet kan forårsake uønskede forhold til studien og opphisse tilstedeværelsen av uklare reagenser eller utfelter.
Fluktuasjoner i elektrisk kraft: For å unngå at hendelsesstrålingen er en feilkilde, anbefales spenningsstabilisatorer for jevn stråling.
Metrologiske egenskaper
Siden strålingsdetektoren som oppdages, er direkte proporsjonal med partikkelkonsentrasjonen, har nephelometriske studier - i teorien - en høyere metrologisk følsomhet enn andre lignende metoder (som turbidimetri).
I tillegg krever denne teknikken fortynnede løsninger. Dette tillater både absorpsjon og refleksjon fenomener å bli minimert.
søknader
Nephelometriske studier har en svært viktig posisjon i kliniske laboratorier. Anvendelsene spenner fra bestemmelsen av immunglobuliner og proteiner av akutt fase, komplement og koagulasjon.
Påvisning av immunkomplekser
Når en biologisk prøve inneholder et antigen av interesse, blandes det (i en bufferløsning) med et antistoff for å danne et immunkompleks.
Nephelometri måler mengden lys som er spredt av antigen-antistoffreaksjonen (Ag-Ac), og på denne måten oppdages immunkomplekser.
Denne studien kan utføres ved to metoder:
Nephelometri av sluttpunktet:
Denne teknikken kan brukes til analyse av endepunktet, hvor antistoffet i den studerte biologiske prøven inkuberes i tjuefire timer.
Ag-Ac-komplekset måles ved hjelp av en nephelometer og mengden av spredt lys sammenlignes med den samme måling som utføres før dannelsen av komplekset.
Kinetisk nephelometri
I denne metoden overvåkes frekvensen av kompleks formasjon kontinuerlig. Reaksjonshastigheten avhenger av konsentrasjonen av antigenet i prøven. Her tas målingene som en funksjon av tiden, så den første måling er tatt på tiden "null" (t = 0).
Kinetisk nephelometri er den mest brukte teknikken, siden studien kan utføres om 1 time, i forhold til den lange perioden av endpointmetoden. Dispersjonsforholdet måles like etter at reagensen er tilsatt.
Derfor, så lenge reagensen er konstant, anses mengden antigen som er presentert direkte proporsjonal med forandringshastigheten.
Andre applikasjoner
Nephelometri brukes vanligvis i vannkemisk kvalitetsanalyse, for å bestemme klarheten og for å kontrollere behandlingsprosessene.
Det brukes også til å måle luftforurensning, hvor konsentrasjonen av partiklene er bestemt fra dispersjonen de produserer i et innfallslampe..
referanser
- Britannica, E. (s.f.). Nephelometri og turbidimetri. Gjenopprettet fra britannica.com
- Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetri og nephelometri. Hentet fra pdfs.semanticscholar.org
- Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Gjenopprettet fra technochemical.com
- Morais, I. V. (2006). Turbidimetrisk og nekhelometrisk strømningsanalyse. Hentet fra repositorio.ucp.p
- Sasson, S. (2014). Prinsipper for nephelometri og turbidimetri. Hentet fra notesonimmunology.files.wordpress.com
- Stanley, J. (2002). Essentials of Immunology & Serology. Albany, NY: Thompson Learning. Hentet fra books.google.co.ve
- Wikipedia. (N.d.). Nephelometri (medisin). Hentet fra en.wikipedia.org