Biokjemiske tester typer, hva de er for og betydning



den biokjemiske tester i mikrobiologi er de et sett med kjemiske tester som utføres på mikroorganismer som er tilstede i en prøve for å identifisere dem; Disse mikroorganismer er vanligvis bakterier. Det finnes et stort antall biokjemiske tester tilgjengelig for en mikrobiolog.

Valget av disse testene er imidlertid basert på foreløpige funn, for eksempel Gram-fargemønsteret og vekstkarakterene, som tillater at bakteriene tildeles en bestemt kategori. De biokjemiske tester er hovedsakelig basert på de metabolske egenskapene til hver type bakterier. 

Ikke alle bakterier har de samme egenskapene, så det undersøkes om de har noe bestemt enzym ved å legge til substratet og vente på at reaksjonen skal oppstå. Vanligvis er denne bestemmelsen gitt ved en endring av farge eller pH i dyrkningsmediet.

Mindre enn 15 biokjemiske tester kreves ofte for pålitelig identifisering av en bakterie opp til artenivå. Å utføre mer biokjemiske tester kan øke tilliten til identifikasjon.

De fleste av disse biokjemiske tester utføres i serum eller blodplasma. Imidlertid kan de også utføres i andre biologiske sekreter som blant annet urin, cerebrospinalvæske, pleurvæske og avføring..

index

  • 1 Klassifisering
    • 1.1 Universal
    • 1,2 differensialer
    • 1.3 Spesifikke
  • 2 Typer biokjemiske tester
    • 2.1 katalasetesten
    • 2.2 oksidasetesten
    • 2.3 Test av saltet mannitolagar (MSA)
    • 2.4 koagulasetest
    • 2.5 Ureaase testen
  • 3 Hva er de biokjemiske testene for??
  • 4 Viktighet
  • 5 referanser

klassifisering

De biokjemiske tester kan klassifiseres i 3 grupper:

universell

Dette er testene som kan utføres på alle prøver, og som veileder mikrobiologen på følgende biokjemiske tester som må utføres for å oppnå en pålitelig identifikasjon..

eksempel

Katalasen og oksidasetesten.

differensialer

Dette er testene som utføres for å identifisere mikroorganismer tilstede i prøven opp til artenivået.

Identifikasjonen er basert på resultatene av en kombinasjon av tester, siden de enkelte resultatene ikke er informative nok til å gjøre identifikasjonen.

eksempel

IMViC-tester og sukkerutnyttelsestester.

spesifikke

De er spesifikke tester for et bestemt sett av arter eller subtype en art. Disse testene gjøres vanligvis for å bekrefte eller identifisere på underartsnivå. Individuelle tester er informative av seg selv.

eksempel

Y-Glutamylaminopeptidase-testen.

Typer av biokjemiske tester

Katalasetesten

Katalasetesten er en test for å demonstrere tilstedeværelsen av katalaseenzym ved å dekomponere hydrogenperoksid til oksygen og vann. En liten mengde bakterier legges til en dråpe hydrogenperoksid (3%) på lysbildet.

Katalasetesten er en enkel test som brukes av mikrobiologer for å hjelpe til med å identifisere bakteriearter og å bestemme muligheten for enkelte mikrober å bryte ned hydrogenperoksid ved å produsere katalaseenzymet.

Hvis oksygenbobler blir observert, betyr det at bakterien har katalaseenzymet, fordi det katalyserer nedbrytning av hydrogenperoksid i oksygen og vann. Det sies da at organismen er katalase positiv (for eksempel: Staphylococcus aureus).

Oksidasetesten

Denne testen brukes til å identifisere mikroorganismer som inneholder enzymet cytokromoksidase (viktig i elektrontransportkjeden). Det er vanlig å skille mellom familiene Enterobacteriaceae og Pseudomadaceae.

Cytokromoksidase overfører elektroner fra elektrontransportkjeden til oksygen (den endelige elektron-akseptoren) og reduserer den til vann. Oksidase-tester gir kunstig elektrondonor og akseptormolekyler.

Når elektrondonoren oksyderes ved hjelp av cytokromoksydase, blir mediet mørkt lilla og regnes som et positivt resultat. Mikroorganismen Pseudomonas aeruginosa er et eksempel på en positiv oksidasebakterie.

Saltet Mannitol Agar Test (MSA)

Denne typen test er både selektiv og differensiell. MSA vil velge organismer som er i stand til å leve i miljøer med høye konsentrasjoner av salt, som arter av Staphylococcus i motsetning til arten av Streptococcus, hvis vekst er hemmet under disse forholdene.

Differensialkomponenten i denne testen er sukker mannitol. Organer som er i stand til å bruke mannitol som matkilde, vil produsere biprodukter av fermentering, som er sure og derfor vil senke mediumets pH.

Syrheten i mediet forårsaker pH-indikatoren, fenolrød, for å bli gul. Eksempler på bakterier som kan differensieres ved denne metoden er: Staphylococcus aureus (positiv fordi det fermenterer mannitol) og Staphylococcus epidermidis (negativ fordi mannitol ikke gjær).

Koagulasetest

Koagulase er et enzym som hjelper koagulerer blodplasma. Denne testen utføres på positive gram-positive og katalase-positive bakterier for å identifisere Staphylococcus aureus (positiv koagulase) Faktisk er koagulase en virulensfaktor for denne bakteriearten.

Dannelsen av blodpropper rundt en infeksjon forårsaket av denne bakterien beskytter trolig den mot fagocytose. Denne testen er veldig nyttig når du vil skille mellom Staphylococcus aureus av andre arter av Staphylococcus som er negativ koagulase.

Urea-testen

Denne testen brukes til å identifisere bakterier som er i stand til å hydrolyse urinstof ved bruk av enzymet urease. Det brukes ofte til å skille mellom kjønn Proteus av andre enteriske bakterier.

Hydrolysen av urea produserer ammoniakk som en av sine produkter. Denne svake basen øker pH i mediet over 8,4 og pH-indikatoren (fenolrød) endres fra gul til rosa. Et eksempel på en positiv urease bakterie er Proteus mirabilis.

Hva er de biokjemiske tester for??

Biokjemiske tester i mikrobiologi brukes til å diagnostisere sykdommer forårsaket av mikrober og å overvåke behandlinger administrert for å bekjempe dem. I tillegg brukes de til screening av smittsomme sykdommer og for prognose..

Den biokjemiske identifikasjonen av mikroorganismer gir en ide om hva disse mikroorganismer er i stand til å gjøre, idet det er mulig å diskriminere forskjellige stammer av samme art ved spesifikke biokjemiske profiler.

Forskjeller i spesifikke enzymatiske aktiviteter informerer om mikroorganismenes økologi, fysiologi eller naturlige habitat, som i noen tilfeller kan anses som viktig informasjon.

betydning

De strukturelle forskjellene i forhold til formen, størrelsen og disposisjonen av bakteriene hjelper svært lite i identifikasjonsprosessen, fordi det er mange arter av bakterier som har lignende form, størrelse og disposisjon.

Av denne grunn er identifiseringen av bakterier til slutt basert primært på forskjellene i deres biokjemiske aktiviteter.

Hver type bakterier har et veldefinert sett av metabolske aktiviteter som er forskjellig fra alle andre arter. Disse biokjemiske "fingeravtrykk" er egenskaper kontrollert av bakterielle enzymer.

Således er biokjemiske tester viktige fordi de hjelper forskeren til å identifisere patogener som er tilstede i en prøve, og på den måten å kunne anbefale pasienten riktig behandling..

referanser

  1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Klinisk biokjemi (8. utgave). Wiley-Blackwell.
  2. Clarke, P. H., & Cowan, S. T. (1952). Biokjemiske metoder for bakteriologi. Journal of General Microbiology, 6(1952), 187-197.
  3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Klinisk biokjemi (5. utgave). Elsevier Helsefag.
  4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Praktisk håndbok for mikrobiologi (2. utgave). CRC Press.
  5. Harrigan, W. (1998). Laboratoriemetoder i matmikrobiologi (Tredje utgave). Academic Press.
  6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktisk mikrobiologi. BI Publikasjoner Pvt Ltd.