Hva er Simple Staining? Toppfunksjoner



den enkel farging er en rask og enkel flekkerprosedyre der en enkelt fargestoff brukes, det er derfor det kalles enkelt. Det er hovedsakelig brukt til å bestemme morfologi og organisering av celler tilstede i en prøve.

Naturligvis har cellene ikke farge, så det er nødvendig å gjøre dem synlige på en eller annen måte når de blir observert i mikroskopet.

Det er viktig å understreke at fargestoffene som brukes i enkel farging, må være grunnleggende med positiv ladning (kationisk), slik at de kan spontant binde seg til cellevegg og cytoplasma.

Disse cellulære strukturer er negativt ladet. Dette er grunnen til at fargestoffet, positivt ladet, er tiltrukket av cellene og binder seg til dem spontant. Således er alle cellene som er tilstede i en prøve, farget farget.

Farger som brukes i enkel farging

Det finnes flere grunnleggende fargestoffer som kan brukes i mikrobiologilaboratoriet. De mest brukte er:

- Methylenblå.

- Krystallfiolett.

- Malakittgrønn.

- Grunnleggende fuchsin.

Alle disse fargene fungerer godt i bakterier fordi de har positivt ladede (kationiske) fargede ioner (kromoforer).

Fargetidene for de fleste av disse fargene er relativt korte. De spenner vanligvis fra 30 sekunder til 2 minutter, avhengig av fargestoffets affinitet.

Det er viktig å huske på at før du farger et utvalg ved enkel farging, må den forlenges og festes til glassruten (lysbilde); Den utvidede og faste prøven kalles et smear.

De 6 trinnene for å utføre en enkel farging

Trinn 1

Plasser lysbildet på et fargestativ og bruk ønsket fargestoff. La den tilsvarende tiden gå.

Vanligvis tar enkel farging noen sekunder eller et par minutter, avhengig av fargen som brukes.

observasjon

I dette trinnet er det viktig å ikke overskride den anbefalte tiden for fargestoffet som brukes, siden krystaller kan danne seg på arket og produsere det som er kjent som "gjenstander" som forvrenger cellens morfologi.

Trinn 2

Vask forsiktig glasset med destillert vann fra en flaske, eller med vann fra springen som strekker seg sakte, til avløpet blir gjennomsiktig. Dette tar vanligvis 5 til 10 sekunder.

observasjon

Ikke bruk vannstrømmen direkte på smøret, for å hindre at kraften fra det samme skader prøven.

Hvis du ikke har destillert vann, kan du bruke kranvann uten noe problem, da det ikke vil påvirke fargestoffet.

Trinn 3

Tør lysbildet med absorberende papirhåndklær i en retning og uten å gni. Pass på at bunnen av lysbildet er ren.

Trinn 4

Vær oppmerksom på det flekkete smøret i mikroskopet. Begynn med de fjerneste målene for å riktig finne området du vil observere mer detaljert. Bytt mål for å komme nærmere og nærmere prøven.

observasjon

For bruk av linsen med høyest forstørrelse (normalt 100X), bør nedsenkningsolje brukes, siden det hjelper lyset til å trenge inn bedre og bildet blir skarpere. Det er ikke nødvendig å bruke en deksel.

Trinn 5

Til slutt, kast alle prøvene i en passende beholder som er riktig merket som "biohazard".

referanser

  1. (2001). Mikrobiologiske anvendelser: Laboratoriehåndboken i generell mikrobiologi (8 th ed.). The McGraw-Hill Companies.
  2. Harisha, S. (2006). En introduksjon til praktisk bioteknologi (1st). Brannmurmedier.
  3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D. P. (2009). Foreløpig farging av bakterier: Enkle flekker. Aktuelle protokoller i mikrobiologi, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Alcamos laboratoriums grunnlag for mikrobiologi (10th). Jones & Bartlett Learning.
  5. Prescott, H. (2002). Laboratorieøvelser i mikrobiologi (5 th). The McGraw-Hill Companies.
  6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Prinsipper for mikrobiologi (1st). Tata McGraw-Hill Education.