Næringsrik agar grunnlag, forberedelse og bruk



den næringsrik agar det er et ikke-selektivt og ikke-differensielt fast kulturmedium. I dette miljøet vokser alle slags bakterier ikke fra næringsmessig synspunkt.

Det er en enkel måte, og til tross for navnet sitt, inneholder den lavere næringsverdi sammenlignet med andre lignende medier, for eksempel hjerneinfusjonsagar eller tryptikase soyaagar.

Dens nytte i laboratoriet er veldig variert. Hovedsakelig brukt for subkultur av arter, vedlikehold av stammer, telling av kolonier, som grunnlag for å forberede blodagar, blant andre.

På samme måte, på grunn av sin lyse beige farge, fremstilles pigmenter som frembringes av noen bakteriestammer, som det grønne pigmentet av Pseudomonas aeruginosa, mursteinrødt pigment produsert av Serratia marcescens ved romtemperatur, det gyldne gule pigmentet av Staphylococcus aureus, blant annet.

I tillegg er det et av de mest økonomisk voksende mediene som finnes i markedet.

index

  • 1 Foundation
  • 2 Sammensetning
  • 3 Fremstilling
  • 4 bruksområder
    • 4.1 Som grunnlag for fremstilling av blodagar
    • 4.2 Stimulere sporuleringen av spordannende bakterier
    • 4.3 Vedlikehold av belastning
    • 4.4 Koloni teller
    • 4.5 Gjennomføring av diagnostiske tester
    • 4.6 Gjenoppretting av mesofil aerobt rekreasjons saltvann (Strender)
  • 5 referanser

fundament

Som allerede nevnt er det en veldig enkel måte som er basert på å gi næringsstoffer til bakteriell vekst uten begrensninger og uten komplekse reaksjoner for å tolke.

Ettersom mediet er gjennomskinnelig, er det ideelt for å telle kolonier ved metoden for såing ved dybde.

sammensetningen

Den består hovedsakelig av kjøttekstrakt eller gjærekstrakt, peptoner eller pankreas gelatinedeltning, agar-agar, natriumklorid og destillert vann.

Ekstrakten av kjøtt eller gjær og peptoner representerer kildene til karbon og essensielle mineraler (nitrogen, fosfor og svovel), som vil bli brukt av bakterier som energikilde og vekstfaktorer.

På samme måte er agar-agar grunnlaget for alle faste voksende medier, som erstatter gelatin, som var den første basiske forbindelsen som ble brukt av Robert Koch for å gi sin solid soliditet i media..

Agar er et polysakkarid sammensatt av galaktose, galaktomannan, agarose og agaropektin. Den setter ved 40 ° C og smelter nær 100 ° C.

For sin del gir natriumklorid mediet den osmolaritet som er nødvendig for bakteriell utvikling.

Til slutt tjener vannet å hydrere og oppløse de lyofiliserte forbindelser. Destillert vann justert til nøytral pH bør brukes. Kranvann skal ikke brukes fordi det inneholder kalsium og magnesium som kan reagere med fosfatene i mediet og danne uoppløselige salter.

forberedelse

For en liter næringsmiddel agar skal 31 g av dehydratiserte medium veies. Den er plassert i en fiola og oppløst i en liter destillert vann. Etter 5 minutters hvile, varme over en varmekilde og bland den konstant til den koker i 1 eller 2 minutter.

Legg deretter fiola i en autoklav og steriliser ved 121 ° C i 20 minutter.

På slutten av tiden blir den fjernet fra autoklaven og serveres i sterile petriskål, ved hjelp av en laminar-hette eller Bunsen-brenneren..

Hvis petriskålene er disponible (plast), skal mediet fordeles når agar har en temperatur på ca. 50 ° C for å forhindre at de blir deformert av for høy varme.

Tillat å størkne og lagre i en plateholder innvendig og kjøle ned ved 2-8 ° C til bruk.

Plattene må tempereres før det blir sådd. Nærende agarplater bør ikke brukes hvis de er forurenset eller dehydrert.

PH av det fremstilte medium bør justeres til 7,3 ± 0,2.

søknader

Det er det enkleste kulturmediet som brukes i mikrobiologi laboratoriet. Dens formulering er utmerket for veksten av ikke-krevende bakterier.

Hovedbruken er forklart nedenfor:

Som en base for fremstilling av blodagar

Dette mediet brukes noen ganger som en base for å fremstille blodagar, men det er ikke den mest brukte basen.

Stimulere sporuleringen av spordannende bakterier

Dette dyrkningsmedium er spesielt nyttig for å stimulere sporuleringen av spordannende bakterier, slik som Bacillus sp.

For å gjøre dette blir en stamme av slekten sådd Bacillus og inkubert i 24 timer ved 37 ° C i aerobiosis. Når koloniene er vokst, blir platen utsatt for en temperaturstemperatur, det vil si at ovnenes temperatur økes til 44 ° C og forlates i 24 timer mer eller det blir introdusert i kjøleskap i 24 timer.

På slutten av beskjæringen blir kulturene utvidet og farget med Gram stain eller Shaeffer-Fulton spore flekk. I dem vil baciller med endosporer (sporer inne i bacillus) og eksosporer (sporer utenfor bacillus) bli observert..

Vedlikehold av stamme

Noen forskningslaboratorier eller støtte til universitetspedagogikk er nødvendig for å opprettholde levedyktige bakterier av klinisk betydning så lenge som mulig, for å kunne bruke banken bakterier (bacterioteca) for forskning eller for utarbeidelse av undervisningspraksis der Studentene skal lære å manipulere og identifisere disse mikroorganismer.

Den næringsrike agar, så vel som hjerneinfusjonsagar, kan brukes til dette formålet. agar fremstilles, heller på kork av bakelitt og lene seg på en base, slik at agaren størkner danner en plugg i bunnen og en skråflate (skrå).

Hvert rør er merket ved å sette navnet på bakteriene som skal plantes og datoen. På bekkenet blir hver av bakteriene plantet og inkubert i 24 timer, når koloniene er vokst, blir rørene lagret ved romtemperatur.

Bakterioteca må fornyes fra 1 til 3 måneder, for å unngå forurensning og dehydrering av mediet og i tillegg til bakteriedød.

Bare ikke-krevende bakterier kan opprettholdes på denne måten.

Koloni teller

Selv om det er spesielle media for kolonitelling som standard agar konto, kan den næringsagar anvendes for dette formål, enten ved poding overflate med Drigalski spatel eller dybde. Derfor er det meget nyttig i mikrobiologisk analyse av mat og vann.

Utførelse av diagnostiske tester

Fordi det er et medium som ikke inneholder blod eller noe annet additiv, er det ideelt å ta kolonier vokst i dette mediet for å utføre katalasetestenen.

På samme måte, på grunn av sin klare farge, er det indikert å utføre oksidasetester direkte på et område av den podede agar uten forstyrrelser.

Utvinning av mesofil aerobisk rekreasjons saltvann (Strender)

Næringsstoffer agar forberedt med 10% sjøvann er nyttig for evaluering av mesofile aerobes i strandvann.

På denne måten kan vi sette pris på nivået av ekte forurensning som vannet har med disse mikroorganismer, siden i denne typen prøver blir resultatene overlappet når man bruker kultivemedier tilberedt på vanlig måte.

Dette ble demonstrert av Cortez et al. i 2013 i et forskningspapir.

Dette er forståelig på grunn av den brå endringen lidelse bakterier som passerer en hipersalado miljø ved en lav salt miljø derfor mikroorganismer angi en sovende tilstand i hvilken de er levedyktige, men ikke dyrkbare.

referanser

  1. "Næringsrik agar." Wikipedia, Den frie encyklopedi. 13. september 2016, 20:33 UTC. 29. desember 2018, 21:04 no.wikipedia.org
  2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologisk diagnose av Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Panamericana S.A Editorial.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. (5. utgave). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
  4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Effekt av kulturmedier tilberedt med sjøvann på helseindikatorer i marine farvann i Chichiriviche spa, Falcón-staten, Venezuela. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
  5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M og Cardoso M. Mikrobiologisk vannkvalitet for inseminerende doser, for Suinos.Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktisk klinisk mikrobiologi. Universitetet i Cadiz, 2. utgave. UCA Publikasjonstjeneste.