Agar salt og manitol grunnlag, forberedelse og bruk



den saltagar og mannitol eller salt mannitol er et fast, selektivt og differensialkulturmedium. Det ble skapt av Chapman for isolering av patogene Gram positive cocci, spesielt Staphylococcus aureus.

Det er imidlertid også nyttig å isolere Staphylococcus epidermidis, som noen ganger kan være tilstede som et opportunistisk patogen, og Staphylococcus saprophyticus, anerkjent urinpatogen, blant andre arter.

Noen Enterococcus er i stand til å vokse i dette mediet, så vel som visse Gram positive spore-forming baciller.

Dette mediet er veldig nyttig i analysen av kliniske prøver, men den brukes også i mikrobiologisk undersøkelse av matvarer og i kvalitetskontroll av industriprodukter, for eksempel kosmetikk, medisiner, blant andre..

Saltet mannitolagar består av ekstrakter og peptoner av biff, triptin, mannitol, natriumklorid, fenolrød og agar.

index

  • 1 Foundation
  • 2 Fremstilling
  • 3 bruksområder
  • 4 Kvalitetskontroll
  • 5 Endelige hensyn
  • 6 Referanser

fundament

Mannitol agar er selektiv takket være den høye konsentrasjonen av salt den har. Salthet fungerer som en hemmende substans og forhindrer veksten av gramnegative bakterier.

Det er også forskjell på grunn av tilstedeværelsen av mannitolkarbohydrat og fenolrød pH-indikatoren. Fra dette produserer bakteriene som er i stand til gjæring av mannitol syrer, surgjørende mediet, snu koloniene og mediumgulven.

På den annen side vokser kolonier som ikke fermenterer mannitol i mediet og tar næringsstoffene som tilbys av ekstraktene og peptonene av kjøtt og tripteína. Derfra trekkes bakteriene ut av karbon, nitrogen, vitaminer og mineraler som er nødvendige for veksten.

Koloniene i dette tilfellet kan være svake eller sterke rosa, og mediet forblir i samme farge eller endrer seg til fuksi.

Agar er stoffet som gir konsistensen til mediet.

forberedelse

For å fremstille en liter saltet mannitolagar, veies 111 g av dehydratiserte medium av det kommersielle preferansehus og oppløses i 1000 ml destillert vann ved bruk av en fiola.

Varme tilføres ved ofte å fjerne mediet for å forbedre oppløsningen. La det koke i et minutt.

Plasser fiola i autoklaven ved 121 ° C i 15 minutter.

Over tid, ble kolben fjernet fra autoklaven, tillatt å sette seg og serveres fra 15 til 20 ml sterile petriskåler når temperaturen er omkring 50 til 55 ° C.

Det er lov å størkne, bestille i omvendt form i plaqueros og holde i kjøleskapet til bruk. Før du planter en prøve, må du vente på at platen skal ta temperaturen på miljøet.

Platen er sådd ved strikking eller ved såing på overflaten med en drigalski-spatel. Den endelige pH-verdien av det fremstilte medium bør være 7,4 ± 0,2

Fargen på det dehydrerte mediet er lys beige og fargen på det fremstilte medium er oransje rødt.

søknader

På grunn av sin høye selektivitet er dette mediet ideelt for planting av prøver med blandet flora der man ønsker å se etter tilstedeværelsen av Staphylococcus aureus, som det viktigste patogenet i dette slaget.

I denne forstand er en av de mest vanlige bruk i den mikrobiologiske analyser av prøver av baktusprøver og rennende nese, særlig for å detektere asymptomatiske bærere S. aureus.

Noen land har implementert denne analysen som et obligatorisk krav for folk som vil jobbe som matleverandører.

Denne kontrollen forhindrer ansettelse av personer som er bærere av S. aureus, dermed unngår massiv matforgiftning, på grunn av forbruket av mat som er forurenset med stafylokokker, enterotoxin.

Det kan også inkluderes i såing av sårinfeksjoner, blodkulturer, CSF, bronkoalveolær lavage, blant andre..

Saltet mannitolagar er nyttig for å isolere kolonier av urinkulturer fra CLED-agar eller blodagar, hvis gram har avslørt Gram-positive kokker i klynger.

Det er også gyldig i mikrobiologisk analyse av mat, drikkevann, jord, blant annet applikasjoner.

Kvalitetskontroll

Når en gruppe plater med saltet mannitolagar er tilberedt, anbefales det å utføre kvalitetskontroll. Kontrollstammer blir sådd for å vise om det er vekst eller ikke.

Som en positiv kontroll, kjente stammer av Staphylococcus aureus. Det må vokse tilfredsstillende ved å utvikle gule kolonier, og mediet blir også i samme farge.

På samme måte er det praktisk å inkludere en kjent belastning av Staphylococcus epidermidis. Det må vokse tilfredsstillende ved å utvikle rosa kolonier, og mediet forblir i samme farge eller mørkere i en sterkere rosa.

Som en negativ kontroll blir det brukt stammer som ikke skal vokse i dette mediet. For eksempel kan du plante en kjent stamme av Escherichia coli eller Klebsiella pneumoniae. Det forventede resultatet er fullstendig inhibering, det vil si ingen vekst.

I tillegg skal en plate uten inokulasjon inkuberes. I den skal det ikke være vekst, ingen endring av farge.

Det er viktig at platen ikke brukes hvis det er indikasjoner på forverring, som for eksempel forurensning, dehydrering, misfarging, blant andre..

Endelige hensyn

Ved bruk av saltet mannitolagar-medium må enkelte viktige aspekter tas i betraktning:

-Å oppnå vekst av gule kolonier indikerer ikke at den er Staphylococcus aureus. Det må huskes at noen stammer av Enterococcus er i stand til å vokse i dette mediet og gjær mannitol, samt visse Gram-positive sporeformende baciller..

Derfor er det viktig å utføre et gram til kolonien og en katalasetest.

-På den annen side må det vurderes at andre arter av Staphylococcus forskjellig fra aureus De er også i stand til å gjære mannitol. Derfor er det viktig å sub-kultivere kolonien til en næringsbuljong for å ta derfra og utføre koagulastestesten.

Blant Staphylococcus-arter av klinisk betydning for mann som fermenterer mannitol er: S. aureus, S. simulans, S. capitis capitis ssp, S. capitis urealyticus ssp, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, blant annet.

Andre kan gi en variabel reaksjon, det vil si noen ganger positiv og noen ganger negativ. Noen er S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, blant annet.

-Det anbefales ikke å ta kolonier direkte fra mannitolagar til å utføre koagulasetesten, siden høysaltskonsentrasjonen av mediet kan forstyrre resultatet.

-Til slutt anbefales det å inkubere platene som er frøet med saltet mannitol i opptil 48 timer, på grunn av at noen stammer av S. aureus De kan gjær sakte mannitol, selv om dette ikke er veldig hyppig.

referanser

  1. Laboratorier Britania. Mannitol salt agar. 2015. Tilgjengelig på: britanialab.com
  2. "Saltet Mannitol Agar". Wikipedia, Den frie encyklopedi. 31. oktober 2018, 19:08 UTC. Jan 17 2019, 20:55, tilgjengelig på: en.wikipedia.org.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. (5. utgave). Argentina, Editorial Panamericana S.A..
  4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologisk diagnose av Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Panamericana S.A Editorial
  5. BD Laboratories BD Mannitol Salt Agar. 2013. Tilgjengelig på: bd.com.