Agar Salmonella-Shigella fundament, forberedelse og bruk



den Salmonella-Shigella agar det også er kjent som SS-agar er et moderat selektivt og differensielt medium, spesielt utviklet for isolering av ropatogene bakterier av slektene Salmonella og Shigella, både fra miljøprøver og kliniske.

SS agar har en kompleks sammensetning; Den består av kjøttekstrakt, pepton, laktose, gallesalter, natriumcitrat, natriumtiosulfat, ferricitrat, agar, nøytralrødt, brilliantgrønt og destillert vann. Gitt sin store selektivitet, er det mulig å plante prøver med rikelig blandet flora.

I mikrobiologilaboratorier Salmonella Shigella medium anvendes for å undersøke tilstedeværelse av Salmonella og Shigella i avføringsprøver diarrheal, kloakkvann, drikkevann og mat.

Noen ganger er det nødvendig å bruke pre-anrichment buljonger (laktos bouillon) og anrikning (selenitt cystine bouillon) for å gjenopprette Salmonella stammer.

Disse trinnene kreves når eksistensen av Salmonella mistenkes i svært liten mengde, eller hvor stammen kan bli mishandlet ved prosesser som er typiske for industriell produksjon, hovedsakelig behandlet mat. Det er også tilrådelig å berikke avføringprøver fra pasienter som har blitt behandlet med antibiotika.

Deretter kan anrikningsbuljong bli sådd ut i agar Salmonella Shigella og andre lignende midler, som for eksempel xylose agar, lysin deoksycholat (XLD) agar og Hektoen enterisk (HE).

index

  • 1 Foundation
    • 1.1 Ernæringsmessig kraft
    • 1.2 Konsistens
    • 1.3 Selektiv
    • 1.4 Differensial
  • 2 Fremstilling
  • 3 Bruk
  • 4 begrensninger
  • 5 Kvalitetskontroll
  • 6 Referanser

fundament

Hver komponent av Salmonella-Shigella kulturmediet har en bestemt funksjon, og blandingen som helhet gir den egenskapene som preger den.

Næringsrik kraft

Kjøttekstrakt og pepton (kaseinbehandlet og animalsk vev) tilveiebringe de nødvendige næringsstoffer (nitrogen, karbon og vitaminer) for utvikling av mikroorganismer som er i stand til å tolerere de andre komponentene.

konsistens

Agar-agar er ansvarlig for å gi solid konsistens til mediet.

selektiv

Dette mediet er svært selektivt fordi det inneholder gallsalter, natriumcitrat og lysegrønn. Derfor hemmer det veksten av alle Gram-positive bakterier og de fleste Gram-negative baciller, inkludert noen coliforms.

Mens bakterier av slekten Salmonella og noen stammer av Shigella støtter disse forbindelsene.

Hovedsaket er slekten Salmonella veldig motstandsdyktig overfor gallsalter, så mye at de er i stand til å leve i galleblæren hos enkelte transportpatienter som kontinuerlig utviser bakteriene gjennom avføringen..

differensial

Laktose er det gjærbare karbohydratet som bidrar til å differensiere laktosefermentestammene fra de ikke-fermenterende stammene. Denne egenskapen fremgår av nærværet av pH-indikatoren, som i dette medium er fenolrød.

Laktosefermentestamlene gir røde kolonier, mens de ikke-fermenterende stammene er fargeløse. Denne egenskapen er viktig, siden Salmonella og Shigella ikke gjærer laktose.

På den annen side inneholder dette medium natriumtiosulfat som en kilde til svovel og ferriscitrat som en kilde til jern. Begge stoffene er i stand til å skille bakterier i stand til å produsere hydrogensulfid. Disse reagerer for å danne et svart bunnfall av uoppløselig og synlig ferrisulfid.

Denne egenskapen har noen stammer av slekten Salmonella. Normalt er deres kolonier fargeløse flate med en svart prikk i midten av den. Resten av salmonellene produserer ikke H2S og utvikle seg som fargeløse kolonier.

På den annen side er kolonier av slekten Shigella fargeløse flate uten svetting.

forberedelse

Dette betyr at det er veldig enkelt å forberede.

Veid 63 g av dehydratiserte kommersielle medium og oppløs i 1 liter destillert vann. Varm oppløsningen og rør. Blandingen kan kokes i opptil minutter.

Dette mediet bør ikke autoklaveres. Etter oppløsningen serveres den direkte på enkle eller dobbelte sterile plater.

Når de størkner, er de ordnet på en invertert måte i plakkmakere og oppbevart i kjøleskap (2-8 ° C) til de brukes.

Mediet etter tilberedning skal være pH 7,2 ± 0,2 og oransje rødt.

Det er viktig å la platene herdes før prøvene sår. Du kan direkte frø av den opprinnelige prøven, tømme materialet på en del av agaret og deretter derfra striate ved utmattelse.

Ved bruk av berikte buljonger, pass en del av selenittbuljongen og så med drigalski spatel.

Inkuber ved 37 ° C i 24 timer i aerobiosis.

Husk at mengden gram som skal veies og den endelige pH i mediet kan variere fra ett kommersielt hus til et annet. Basisplaten på mediet bringer alltid indikasjonene på forberedelsen.

bruk

Det brukes ofte i analysen av avføringskulturer og i den mikrobiologiske studien av gjenværende vannprøver, drikkevann og mat.

Ofte fremstilles dobbeltplater, på den ene siden er Salmonella-Shigella agar plassert og på den andre siden XLD-agar.

begrensninger

-Noen stammer av Shigella vokser ikke i dette mediet. Derfor anbefales det ikke for primær isolasjon av slekten.

-Ikke hver klar koloni med et svart senter er et tegn på Salmonella; biokjemiske tester må utføres for å få en korrekt identifikasjon, siden koloniene av noen stammer av Proteus er skiller seg fra Salmonella.

-Det dehydrerte mediet bør være forsiktig med eksponering for miljøet, da det er veldig hygroskopisk. Derfor må det oppbevares i et tørt og godt lukket miljø. Åpne for svært korte perioder.

-Over tid kan gallsalter i mediet falle ut, og danner et bilde som ligner en mattet i agaret, men dette påvirker ikke resultatene.

-Noen stammer av Shigella kan sakte gjære laktose.

Kvalitetskontroll

For å bevise at mediet fungerer riktig, anbefales det å plante kjente eller sertifiserte kontrollstammer og observere om veksten oppfyller forventede egenskaper.

Til dette formål, stammer av E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium eller Enterococcus faecalis.

De forventede resultatene er:

Escherichia coli --rosa konvekse kolonier.

Enterobacter og Klebsiella- store kolonier og rød eller rosa mucoid.

Shigella flexneri --klare eller fargeløse flate kolonier.

Salmonella typhimurium - fargeløse kolonier med svart senter.

Enterococcus faecalis-- total inhibering.

referanser

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella agar. 2009. Tilgjengelig på: f-soria.es
  2. BD Laboratory. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Tilgjengelig på: bd.com
  3. Laboratorier Britania. Salmonella-Shigella Agar. 2015. Tilgjengelig på: britanialab.com
  4. Valtek diagnostikk. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar) .2010. Tilgjengelig på: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologisk diagnose av Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Argentina.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. utg. Editorial Panamericana S.A. Argentina.